Hochest 33258 染色液

 產(chǎn)品貨號：B2884

存儲條件：-20℃避光保存，有效期一年。

產(chǎn)品描述

Hoechst 33258是可透過細胞膜并對DNA染色的細胞核染色試劑，在嵌入雙鏈 DNA 后釋放強烈的藍色熒光。Hoechst 33258常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33258-DNA 的激發(fā)和發(fā)射波長分別為 350nm 和 460nm。

產(chǎn)品性質(zhì)

使用方法

1、對于固定的細胞或組織：

1)對于細胞或組織樣品，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色，則先進行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進行Hoechst 33258染色。如果不需要進行其它染色，則直接進行后續(xù)的Hoechst 33258染色。

2)對于貼壁細胞或組織切片，加入少量Hoechst 33258染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞，至少加入待染色樣品體積3倍的染色液，并混勻。室溫放置 3-5 min。

3)吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS 或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5min。

4)直接在熒光顯微鏡下或封片后熒光顯微鏡下觀察。觀察細胞凋亡時，會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。         

2、對于活細胞或組織：

5)加入適當(dāng)量Hoechst 33258染色液，必須充分覆蓋住待染色的樣品，通常對于六孔板一個孔需加入1ml 染色液，對于96孔板一個孔需加入100ul染色液。

6)在適宜于細胞培養(yǎng)的溫度培養(yǎng)20-30min。棄染色液，用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進行熒光檢測。

注意事項

1)Hoechst 33258 對人體有一定刺激性，請注意適當(dāng)防護。

2)熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測。

3)為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

4)為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。